Е. А. Беляева, Н. Л. Еремеев

Кинетическая демонстрация локальных конформационных изменений вблизи активного центра a-химотрипсина в смесях вода – диметилсульфоксид

Изучено влияние структуры и скорость-лимитирующей стадии реакции гидролиза субстратов, различающихся между собой N-ацильными заместителями и уходящими группами, на кинетическое поведение a-химотрипсина в системе вода–диметилсульфоксид (ДМСО) при неденатурирующих концентрациях органического растворителя (менее 30 об.%). Показано, что фактором, определяющим наблюдаемые кинетические закономерности, является структура N-заместителя аминогруппы субстрата. Выдвинуто предположение о том, что ДМСО специфическим образом взаимодействует с белковой глобулой a-химотрипсина, по всей вероятности, в районе сорбционного участка R₁-группы субстрата. Ковалентная иммобилизация a-химотрипсина в полиакриламидный гель протектирует белок по отношению как к неспецифическому (денатурирующему), так и к специфическому действию ДМСО. Совокупность полученных данных позволяет утверждать, что специфическое взаимодействие ДМСО с a-химотрипсином (предположительно в кармане связывания R₁-группы N-замещенных аминокислотных субстратов) индуцирует локальные конформационные изменения “нативной” структуры активного центра фермента.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2000, том 41, № 6, стр. 392-394