А.В. Петракова, А.Е. Урусов, А.В. Жердев, Б.Б. Дзантиев

Сравнение методов иммобилизации антител на поверхности магнитных частиц в псевдогомогенном иммуноферментном анализе афлатоксина В1

С использованием конъюгатов моноклональных антител против афлатоксина В1 (АФВ1) и магнитных частиц (МЧ) реализован псевдогомогенный иммуноферментный анализ (ИФА) АФВ1, включающий концентрирование АФВ1 из пробы на поверхности конъюгата МЧ-антитела, связывание конъюгата АФВ1-пероксидаза со свободными сайтами антител, отделение с помощью магнитного поля сформированных комплексов от непрореагировавших компонентов и регистрацию ферментативной активности связанной с МЧ пероксидазы. Сопоставлены препараты конъюгатов антител, полученные тремя способами – физической адсорбцией на нативных МЧ и ковалентным связыванием с оболочками МЧ, сформированными либо из олеиновой кислоты, либо из полистирола. Показано, что для этих препаратов ИФА характеризуется пределами обнаружения АФВ1 2,6; 0,4 и 0,6 нг/мл соответственно. Псевдогомогенный формат ИФА обеспечивает сокращение времени инкубации иммунореагентов до 5 мин (общая длительность анализа 20 мин) и позволяетконцентрировать определяемый аналит из проб, что обусловливает его преимущества как средства высокочувствительного контроля токсичных контаминант в пищевой продукции.
Ключевые слова: магнитные частицы, иммуноферментный анализ, иммобилизация антител, афлатоксин В1.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2015, том 56, № 6, стр. 372-378