Aндрей Михайлович Чулкин, Валерий Юрьевич Кислицин, Иван Никитич Зоров, Игорь Александрович Шашков, Александра Михайловна Рожкова

Влияние нокаута транскрипционного фактора TасAна транскрипцию и экспрессию гена CBHIв штамме мицелиального гриба Penicilliumverruculosum

Аннотация. Ген tacA, кодирующий белок-репрессор TacA, был клонирован методом "прогулки по неклонированной ДНК" из геномной ДНК гриба Penicillium verruculosum B1-221-151. Нокаут генов tacA и niaD методом CRISPR/CAS9 привел к получению нового штамма-реципиента P. verruculosumΔniaDΔtacA, характеризующегося более высокой скоростью биосинтеза внеклеточного белка. Анализ транскрипции и экспрессии гена cbhI в исходном штамме P. verruculosum B1-221-151 и в штамме P. verruculosumΔniaDΔtacA показал резкий рост уровня транскрипции гена cbhI уже через 2 ч после начала индукции целлобиозой, целлотриозой, гентиобиозой и смесью ди- и трисахаридов по сравнению с транскрипцией гена cbhI в исходном штамме. Удельная активность целлобиогидролазы I, основного фермента целлюлолитического комплекса гриба P. verruculosum, через 96 ч ферментации штамма ΔtacA увеличилась в 3 раза по сравнению с исходным штаммом.
Ключевые слова: транскрипционный фактор, СRISPR/CAS9, целлобиогидролаза I
DOI: 10.55959/MSU0579-9384-2-2023-64-2-121-129

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2023, том 64, № 2, стр. 121-129