K.M. Koноплина, E.Н. Koсобокова, E.В. Шешукова,M.В. Пинюгина, A.A. Maльченкова, В.С. Koсоруков
Оптимизация Agrobacterium-опосредованной транзиторной
экспрессии иммуноцитокина на основе интерферона-α-2b человека и антитела
против опухолевого антигена HER2 в Nicotiana benthamiana
Реферат
Один из способов повышения эффективности транзиторной
экспрессии целевого белка в растениях с помощью Agrobacterium tumefaciens заключается
в оптимизации состава раствора для агроинфильтрации. В настоящей работе методом
статистического планирования эксперимента исследовано, как влияет на выход
целевого иммуноцитокина введение в среду для агроинфильтрации некоторых
химических добавок. Показано, что ацетосирингон (600 мкМ) и сурфактант Pluronic
F-68 (0,2%) существенно повышают выход целевого белка, липоевая кислота (0–5
мкМ) и повидон (0–0,5 г/л) не оказывают значимого влияния на этот показатель, а
аскорбиновая кислота в концентрации 25–50 мМ значимо снижает выход. При
использовании раствора определенного состава, полученного для агроинфильтрации,
выход целевого белка составил более 500 мкг/г, что достаточно для практического
получения рекомбинантных белков в растениях.
Ключевые слова: агроинфильтрация, оптимизация экспрессии
белка, статистическое планирование эксперимента, транзиторная экспрессия, Nicotiana
benthamiana.
Полный текст статьи в формате PDF
Вестник Московского Университета.
Химия 2020, том 61, № 5, стр. 353-360
Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2020
|