О.Г. Короткова, М.В. Семенова, Е.А. Рубцова, О.А.Синицына, Е.Г. Кондратьева, Н.М. Бибиков, А.М. Рожкова, А.П. Синицын

Сравнительный анализ свойств рекомбинантной эндо-1,4-β-глюканазы II и ее химерной формы с целлюлозосвязывающим модулем

Методами генетической инженерии получена химерная форма эндо-1,4-β-глюканазы II (ЭГII) Penicillium verruculosum,к С-концу которой присоединен целлюлозосвязывающий модуль (ЦСМ) целлобиогидролазы I P. verruculosum (ген egII не имеет участка, кодирующего ЦСМ). Были изучены свойства полученного химерного фермента, выделенного в гомогенной форме. Присоединение ЦСМ привело к существенному увеличению активности химерного фермента по отношению к микрокристаллической целлюлозе (МКЦ), а также к "появлению" его адсорбционной способности по отношению к целлюлозе, однако присоединение ЦСМ вызвало уменьшение активности по отношению к растворимым полисахаридным субстратам (карбоксиметилцеллюлозе и β-глюкану). Наличие ЦСМ позволило химерной форме фермента в составе целлюлазного комплекса более эффективно гидролизовать целлюлозосодержащие субстраты и увеличить выход продуктов. Прирост восстанавливающих сахаров (ВС) в случае гидролиза МКЦ в течение 24 ч целлюлазным комплексом, содержащим целлобиогидролазу I, β-глюкозидазу и ЭГII-ЦСМ, по сравнению с комплексом, в состав которого входила ЭГII без ЦСМ, составил 22%, для измельченной осиновой древесины увеличение выхода ВС составило 42%.
Ключевые слова: эндо-1,4-β-глюканаза, целлюлазный комплекс, целлюлозосвязывающий модуль, гидролиз, Penicillium verruculosum.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2019, том 60, № 5, стр. 296-303