Сироткин В.А., Мухаметзянов Т.А., Соломонов Б.Н.

УФ-спектрофотометрическое изучение связывания профлавина бычьим панкреатическим a-химотрипсином в смесях вода–ацетонитрил

C помощью метода УФ-спектрофотометрии изучена способность бычьего панкреатического a-химотрипсина к связыванию профлавина в зависимости от состава водно-ацетонитрильной смеси. Содержание органического растворителя варьировалось от 0 до 99,5 об.%. Обнаружено, что существует сложная зависимость связывающей способности a-химотрипсина от содержания ацетонитрила (АН). В чистом водном растворе способность фермента к связыванию самая высокая. При содержании АН 4,5 об.% степень связывания профлавина падает приблизительно в 2,3 раза. Повышение концентрации АН (30–70 об.%) существенным образом воздействует на свойства фермента: он практически не связывает профлавин. Однако при более высоких концентрациях органического растворителя (80–98,5%) фермент частично восстанавливает свою связывающую способность. В “сухом” ацетонитриле фермент практически не связывает профлавин. На основании литературных данных по состоянию водородных связей воды в ацетонитриле изменения в связывающей способности фермента были интерпретированы как результат одновременного действия следующих факторов: разрушение пространственной сетки водородных связей воды и понижение конформационной подвижности белковой макромолекулы при уменьшении содержания воды.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2003, том 44, № 1, стр. 19-24