K.M. Koноплина, E.Н. Koсобокова, E.В. Шешукова,M.В. Пинюгина, A.A. Maльченкова, В.С. Koсоруков

Оптимизация Agrobacterium-опосредованной транзиторной экспрессии иммуноцитокина на основе интерферона-α-2b человека и антитела против опухолевого антигена HER2 в Nicotiana benthamiana

Один из способов повышения эффективности транзиторной экспрессии целевого белка в растениях с помощью Agrobacterium tumefaciens заключается в оптимизации состава раствора для агроинфильтрации. В настоящей работе методом статистического планирования эксперимента исследовано, как влияет на выход целевого иммуноцитокина введение в среду для агроинфильтрации некоторых химических добавок. Показано, что ацетосирингон (600 мкМ) и сурфактант Pluronic F-68 (0,2%) существенно повышают выход целевого белка, липоевая кислота (0–5 мкМ) и повидон (0–0,5 г/л) не оказывают значимого влияния на этот показатель, а аскорбиновая кислота в концентрации 25–50 мМ значимо снижает выход. При использовании раствора определенного состава, полученного для агроинфильтрации, выход целевого белка составил более 500 мкг/г, что достаточно для практического получения рекомбинантных белков в растениях.
Ключевые слова: агроинфильтрация, оптимизация экспрессии белка, статистическое планирование эксперимента, транзиторная экспрессия, Nicotiana benthamiana.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2020, том 61, № 5, стр. 353-360