В.Г. Григоренко, И.П. Андреева, М.Ю. Рубцова, В.В. Бурмакин, И.В. Упоров, А.М. Егоров
Изучение
каталитических свойств рекомбинантных β-лактамаз ТЕМ-1 и ТЕМ-171
молекулярного класса А
Реферат
Созданы
штаммы-продуценты и получены гомогенные препараты рекомбинантных ферментов
β-лактамаз класса А TEM-1 и ТЕМ-171, отличающихся аминокислотной заменой
валина в положении 84 на изолейцин (Val84Ile). Определены кинетические
параметры β-лактамазы ТЕМ-171 с использованием хромогенного субстрата
CENTA (Km,каж= 23 мкM, kкат= 102 с–1). Установлен конкурентный тип ингибирования
рекомбинантных β-лактамаз ТЕМ-1 и ТЕМ-171 тазобактамом; значения констант
ингибирования в реакции гидролиза субстрата CENTA составили 0,057 и 0,047 мкM
для ТЕМ-1 и ТЕМ-171 соответственно. Показано, что мутация (Val84Ile) приводит к
уменьшению стабильности фермента ТЕМ-171 в 1,5 раза.
Ключевые слова: рекомбинантная
β-лактамаза TEM-1, TEM-171, CENTA, кинетические параметры, тазобактам,
конкурентный тип ингибирования.
Полный текст статьи в формате PDF
Вестник Московского Университета.
Химия 2015, том 56, № 6, стр. 336-342
Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2015
|