ChemNet
 
Вестник Московского Университета, серия "Химия"
Предыдущая статья Следующая статья Содержание  

Т.А. Богуш, А.С. Шатурова, Е.А. Дудко, Э.Э Жураев, Б.Е. Полоцкий, Г.В. Унгиадзе, М.И. Давыдов

Количественная иммунофлуоресцентная оценка с использованием проточной цитофлуориметрии экспрессии эстрогеновых рецепторов β в солидных опухолях человека

Реферат

Проведена адаптация условий имунофлуоресцентного анализа эстрогеновых рецепторов β(ЭРβ) с использованием проточной цитофлуориметрии (ПЦФ) и моноклональных антител к ЭРβ фирмы Abcam (клон 14С8), специфических по отношению к N-терминальному домену белка ЭРβ человека. Показана возможность фиксации клеток 4%-м раствором формальдегида и варьирования числа клеток в суспензии, что позволяет исследовать не только образцы опухоли, получаемые во время хирургических операций, но и при эндоскопическом обследовании больных и биопсии опухоли. К использованию в клинической практике рекомендована продолжительность инкубации с первичными антителами в течение ночи (15– 20 ч.), а с вторичными – 1,5 ч, что оправдано с точки зрения большей чувствительности метода, сокращения расхода антител и удобства для персонала. Для контроля активности антител в качестве референсной культуры рекомендованы клетки рака молочной железы линии MCF-7 и диапазон концентраций антител 0,06; 1,2 и 2,5 мкг/мл. Для количественной оценки частоты экспрессии ЭРbв солидных опухолях человека обосновано использование антител в области концентраций 1,2; 2,5 и 5 мкг/мл, которая включает область линейной зависимости флуоресцентного специфического окрашивания от концентраций антител и область достижения окрашивания всех клеток в исследуемой клеточной суспензии, а следовательно, и в исследуемой опухоли.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2011, том 52, № 4, стр. 305-312


Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2011


Сервер создается при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований
Не разрешается  копирование материалов и размещение на других Web-сайтах
Вебдизайн: Copyright (C) И. Миняйлова и В. Миняйлов
Copyright (C) Химический факультет МГУ
Написать письмо редактору