Леонтьева О.В., Власова Т.Н., Угарова Н.Н.

Взаимодействие люциферазы светляков с диметилоксилюциферином

Анализ спектров поглощения и флуоресценции диметилоксилюциферина (ДМОЛ) в диапазоне рН 3,9–12,0 показал, что при рН 12,0 значение l_макс поглощения сдвигается с 485 нм (рН 9,6) до 356 нм. При рН 3,9–8,0 l_макс флуоресценции для ДМОЛ составляет 639 нм. При более высоких рН наблюдается дополнительный пик флуоресценции, l_макс = 537 нм (l_ex = 383 нм), интенсивность которого растет во времени. Показано, что этот пик относится к продукту химического превращения ДМОЛ при рН > 9, которое описывается реакцией первого порядка (k = 0,02 мин^–1). Изучены каталитические и флуоресцентные свойства люциферазы светляков в присутствии 20–140 мкМ ДМОЛ при рН 7,8. Из данных по тушению собственной флуоресценции белка определена константа связывания люциферазы с ДМОЛ (K_s = 45,7 мкМ). Показано, что ДМОЛ является сильным ингибитором люциферазы (K_i = 10 мкМ).

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2002, том 43, № 6, стр. 363-366